实用技术丨动物疫病诊断样品的采集技术

样品采集是动物疫病监测诊断工作的前提和基础。样品采集良好能够提升动物疫病的诊断正确率，并提高检测的质量水平。

动物疫病检测采集样品的种类

动物疫病检测采集样品的种类包括血样、活体组织、脏器、肠内容物、分泌物、排泄物或其他材料，病因不明时，应系统采集病料。根据不同动物疫病或检验目的，所需采集的样品也不同。

采样时机的选择

一般情况下，对于采集的常规样品，有临床症状需要做病原分离的，样品必须在病初的发热期或症状典型时采样；病死的动物，应立即采样。

采集血液样品，如果用于病毒检验样品，在动物发病初体温升高期间采集，对于没有症状的带毒动物，一般在进入隔离场后7天以前采集。

确定样品采集数量

采血清测抗体时，每群畜/禽类一般不少于10%的样品（少于100头/羽的话，至少20-30头/羽）。组织样品禽类每份不应少于5g，雏禽脾脏、胰脏等病料建议完整取样；畜类每份不少于5g，厚度最好不要小于1cm，液体病料不应少于5mL，用于保存棉拭子的PBS液以淹过棉拭子为准，最少不应少于1mL。

样品采集的方法

口腔等呼吸系统体液的采集

口腔等呼吸系统体液的采集首先应用灭菌棉拭子蘸取采样部位，正向和反向旋转后，应马上将棉拭子浸入含有保存液的容器里，剪掉外露的棒，贴标签、写采样单，最后将其密封，将其处于低温的状态中进行保存，并尽快送到实验室。

全血的采集

在牛、羊、马等动物身上

采血部位应该在尾静脉和颈静脉处采集

在猪身上

应在前腔静脉和耳静脉处采集

在采血时，按照检测项目的量来决定采血量的多少，同时，在采血前，应先用碘酒消毒杀菌，再用乙醇消毒，保证采血部位干净无污染，无病菌。用一次性注射器采集抗凝血时，可事先在注射器内吸入少量抗凝剂。血液采出后来回颠倒注射器，以让血液与抗凝剂混匀，然后转移到加抗凝剂的离心管再次颠倒混匀。用真空采血管采血应选用含枸橼酸钠或EDTA抗凝剂的真空采血管。

乳汁的采集

清洗并消毒乳房边缘和挤乳手、乳头，最初所挤的3-4股乳汁弃去，然后再采集10ml左右的乳汁，并将其放在灭菌试管中，保持低温状态，送到实验室检验。

粪便和体表样品的采集

在采集体表样品时，应直接采集水肿液和水泡液，并将其放置于无菌离心管中，同时将病变皮肤组织和水泡皮放在保存液里面，保持低温，送去检测。在采集粪便样品时，有两种方式，分别为体外采集和直肠采集，直肠采集时，应用干净的灭菌棉拭子或玻璃棒轻轻挑取，在进行体外采集时，应让粪便保持清新状态，采取5-10g样品。

脏器的采集

在采样前，应该用消毒液对尸体进行消毒，切开皮肤，采样时应从胸腔到腹腔，先采实质器官，做到无菌，避免外源性的污染，最后采集污染的组织，如胃肠组织、粪便等。由于家畜的体格不同，所以采样的样品数量也不同，对于大型家畜，应采样10~12g左右，小型家畜应采样3~5g。

操作注意事项

在采样时，应严格执行好无菌的操作步骤，避免直接接触采样部位，如果出现患畜死亡的情况，应立即进行样品采集，特别是在夏天，切记不要超过6h，冬天不要超过24h。样品搁置的越长，其组织就会腐败、变性，最终导致检测结果受到影响。并且，样品采集的数量需要满足检测的需求，要留出备用，以防止必要的重复检测应用时的数量不足。